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      微生物实验开始前,新购进玻璃器皿的清洁与灭菌处理

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      食品微生物检测实验室使用的玻璃器皿种类很多,应按不同的使用要求选择不同的玻璃品种,大多数选用中兴硬质玻璃(硼酸盐玻璃),硬质玻璃能耐高热、高压、抗温度急变性好、耐腐蚀性好,同时其中游离碱含量低,不会影响培养基的酸碱度。现将玻璃器皿的清洁与灭菌介绍如下。

       

      一、玻璃器皿的清洁

       

      1.新购进玻璃器皿的处理

      新购进玻璃器皿上一般附有游离碱性物质,不能直接使用,应在2%盐酸溶液中浸泡几小时,把表面的碱性中和后,再用肥皂水或洗衣粉洗刷玻璃器皿的内外,然后用清水反复冲洗,来出去残留的酸质,最后用蒸馏水冲洗干净。
      2.对反复使用的玻璃器皿的处理常用的玻璃器皿,如平皿、试管、烧杯、烧瓶等,要先高压灭菌(121℃、30min),趁热倒掉容器中的废弃物,以温水冲净,再加5%肥皂水煮沸5min,然后趁热洗刷干净,最后用蒸馏水冲洗干净。

       

      3.载玻片与盖玻片
      新买的载玻片与盖玻片,以新购进的玻璃器皿处理方法清洗;用过载玻片的可以放入2%来苏尔或5%石碳酸溶液中浸泡好后,取出后水洗,再用5%肥皂水煮沸20min,然后用毛刷蘸肥皂刷洗,最后用清水反复冲洗干净。载玻片浸泡在95%的酒精1min,取出用软布擦干,再放入盛蒸馏水的烧杯中浸泡5min以除去溶剂,烘干备用。

       

      4.清洁剂的种类及使用
      玻璃仪器常用的清洁剂是洗衣粉、去污粉、肥皂、洗液、有机溶剂等。对于可以用刷子直接刷洗的玻璃器皿,可用肥皂、洗衣粉、去污粉的水溶液直接刷洗。对于蒸馏瓶、容量瓶、移液管、滴定管等不容易用刷子刷的仪器,用洗液洗。洗液还可以用来洗刷子刷不下的顽固污渍和久置不用的器皿,洗刷顽固污渍时,要有足够的浸泡时间。使洗液与仪器表面的污物充分发生化学作用;有机溶剂可以用来去除器皿表面的油脂,如甲苯、二甲苯、汽油等;有的也可利用能与水混合又易挥发的特点去除仪器上的水,如酒精、乙醚等。

       

      5.玻璃仪器的洗涤方法与要求

      1)人工清洗:带干净的手套或洗净手,用清水冲洗器皿;选择合适的洁净剂洗刷或浸泡;先用自来水冲洗,再用蒸馏水顺壁冲洗充分震荡,直至玻璃器皿上挂不住水珠,用指示剂检查为中性。

       

      2)超声波清洗:加入清洗剂,利用清洗剂的化学作用和超声波的物理作用,达到对玻璃器皿的成分清洗的目的,超声波在30~40℃时净化效果最好,在实际工作中一般采用40~60℃的工作温度。用清洗剂洗刷完后,再用清水洗,直至达到玻璃器皿清洗要求。

       

      6.玻璃器皿洗刷应注意的问题
      含油脂(石蜡油、凡士林)的玻璃器皿要单独清洗,洗刷前尽量先去油,单独高压灭菌后,趁热倒掉污物,然后将玻璃器皿倒置于铺有粗吸水纸的铁丝筐内,放于100℃烘箱内0.5h,取出后再放入5%碳酸氢钠水中煮两次,然后用肥皂水刷洗干净,最后用蒸馏水冲洗干净。

       

      用来做荧光分析的玻璃器皿仪器应避免用洗衣粉洗,因洗衣粉中的荧光增白剂会影响实验结果。

       

      二、玻璃器皿的包扎

       

      玻璃器皿在灭菌前,应用纸或金属桶等包裹,防止消毒灭菌后,被外界的杂菌所污染。

       

      1.烧杯、三角瓶、试管等

      可用做好的合适的棉塞塞好,外面再用纸和细绳包扎一下,以防棉塞掉下。烧杯可用纸和绳包扎即可。烧杯、三角瓶和试管包扎见下图。

       

      2.培养皿
      可用牛皮纸或双层报纸单个或数个包成一包,也可直接放入特制的培养皿灭菌金属桶内,加盖灭菌。用牛皮纸或报纸包扎的过程如下图。

       

      1)将12个玻璃培养皿按图2~4个堆放在牛皮纸或双层报纸(4开,39cm×54cm)上,两头拧紧。

       

      2)用双手拇指和食指将纸边裹在平皿堆表面,同时用双手的无名指和小指挤紧平板。将平皿堆向前滚,顺势将纸紧紧包裹在平皿堆的外面,整个推进的过程中双手无名指和小指都要挤紧平板。包裹的松紧程度直接决定最终的包扎质量。

       

      3)当纸全部包裹在平板堆表面后,将平板堆数值放在桌面上。将平板堆两头的纸依次叠好别紧。

       

      3.移液管

      在包装前先用长针等在上口处塞少量的棉花(勿用脱脂棉),既可防止吸取液体时,液体被吸出造成污染,又可对吹入吸管的空气起一个过滤作用。塞入的棉花的量要适宜,距管口约0.5cm左右,棉花的长度约1cm~1.5cm。棉花要塞得松紧适度,吹时既能通气又不能使棉花下滑。移液管可用纸分别卷包,也可用多支包成一束或装入金属桶进行灭菌。

       

      单支移液管的包装可先将牛皮纸(或报纸)剪成约5cm的长纸条,再将移液管的尖端放在纸的一段,约成45°角,折叠包好尖端,一手拿管身,一手压紧管和纸,在桌上向前搓滚,使纸成螺旋状把管包起来,上端剩余的纸条折叠后打结即可。见下图。

        

       

      三、玻璃器皿的灭菌

       

      1.干热灭菌

      玻璃器皿干燥包装后可在电热干燥箱内进行干热灭菌,加热160~180℃,维持2h。包装放置在干燥箱内,不要和箱壁接触,打开电源后,先把箱顶部的通气孔打开一点,让湿空气逸出,当箱内温度达到100℃后,关闭通气孔。调节温度控制旋钮到设定的温度,升温至所设定的温度时,维持1h~2h进行灭菌。灭菌完成后,关掉电源,冷却到60℃时,再打开箱门。温度控制旋钮归位,并打开顶部通气孔。灭菌后的器皿,要1周内用完。

       

      2.高压蒸汽灭菌
      在高压蒸汽灭菌器内进行,是一种最普遍的、有效的灭菌方法。

      信息来源:https://mp.weixin.qq.com/s/055i1n38ICR6ETZitEYYfQ

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